磁珠套件介绍和作用
磁珠套件是一种利用磁珠进行生物分离和纯化的工具,用于份子生物学、免疫学、细胞生物学等领域。能够操作简便、快速高效、纯度高、重复性好等优点,近些年来备受科研工作者的青睐。
磁珠套件包括以下几种成份:
磁珠: 磁珠是全部套件的核心,由超顺磁性材料制成,比如可以氧化铁。这些磁珠表面经过特殊处理,可以偶联各种生物配体,比如可以抗体、蛋白A/G、链霉亲和素等,用于捕获目标份子或细胞。 指出,磁珠可以用于捕获细胞,最大支持20L,1E11的细胞。
用/洗涤缓冲液: 用于提供最好的用和洗涤条件,去除非特异性用。
洗脱缓冲液: 用于将目标份子或细胞从磁珠上洗脱下来。
磁力架: 用于在分离进程中固定磁珠,方便去除上清液。
磁珠套件的作用原理是利用磁珠表面的配体与目标份子或细胞的特异性用,然后通过外加磁场将用了目标物资的磁珠分离出来。具体步骤以下:
用: 将磁珠与样品混合,使磁珠表面的配体与目标份子或细胞特异性用。 提到,将磁珠与样品以适当的比例混合后,磁珠便可与样品中目的份子或细胞用。
磁分离: 将混合物放置于磁力架上,磁珠在磁力作用下被吸附到管壁,与上清液分离。
洗涤: 去除上清液,加入洗涤缓冲液,洗去非特异性用的杂质。重复洗涤步骤数次,以提高纯度。
洗脱: 加入洗脱缓冲液,将目标份子或细胞从磁珠上洗脱下来。
磁珠套件运用,以以下举一些常见运用:
免疫沉淀 (IP): 利用抗体偶联的磁珠,从细胞裂解液中分离和富集目标蛋白。 指出,免疫共沉淀Dynabeads磁珠可为小范围分离特殊蛋白带来用能力/得率、重复性、纯度和本钱的最好平衡。
免疫共沉淀 (Co-IP): 与IP类似,但用于研究蛋白质之间的相互作用。
细胞分离: 利用特定抗体偶联的磁珠,从细胞混合物中分离出目标细胞。
核酸提取: 利用磁珠提取基因组DNA、质粒DNA或RNA。
蛋白质纯化: 利用亲和配体偶联的磁珠,从复杂的生物样品中纯化目标蛋白。
操作简便: 全部操作进程简单易行,无需复杂的装备和技术。
快速高效: 相比以前的离心分离方法,磁珠分离速度更快,效力更高。
纯度高: 磁珠分离可以可以去除非特异性用,取得高纯度的目标物资。
重复性好: 磁珠分离的操作步骤标准化,实验结果重复性好。
磁珠套件是一种功能强大、运用的生物分离工具,操作简便、快速高效、纯度高、重复性好等优势使其成为科研工作者的得力助手。技术的不断发展,磁珠套件将在更多领域,有着重要作用。